溶劑提取法
溶劑提取是花青素的常規提取方法,溶劑多選擇甲醇、乙醇、丙酮、水或者混合溶劑等。為了防止提取過(guò)程中非?;幕ㄇ嗨亟到?,常在提取溶劑中加入一定濃度的鹽酸或者甲酸,但在蒸發(fā)濃縮時(shí)這些酸又會(huì )導致?;幕ㄇ嗨夭糠只蛉康乃?。另外,對于提取物中可能含有脂溶性成分的樣品,需采用有機溶劑如正己烷、石油醚、乙醚等進(jìn)行萃取。傳統的溶劑提取方法提取時(shí)間長(cháng),生產(chǎn)效率較低,且熱溶劑容易造成花青素降解以及生理活性的降低。
國外提取花青素的傳統方法是采用低溫(4~8℃)或者常溫(25℃)避光條件下1%HCl甲醇溶液浸提16~20h,或者采用5%、1%的三氟乙酸的甲醇溶液,4℃條件下浸提24h??紤]到食品中殘留甲醇的毒性,也有用1%的HCl乙醇溶液代替甲醇溶液。另外為了避免?;幕ㄇ嗨氐乃?,也可選擇弱酸如酒石酸、檸檬酸代替鹽酸。而國內則多采用熱溶劑(50~70℃)浸提1~2h的方式,溶劑可選擇不同濃度的醇溶液或酸化的水溶液。
加壓溶劑萃取法
加壓溶劑萃取,又稱(chēng)加壓液體萃?。≒ressurizedLiquidExtraction,PLE)、快速溶劑萃?。ˋcceleratedSolventExtraction,ASE),它是通過(guò)外來(lái)壓力提高溶劑的沸點(diǎn),進(jìn)而增加物質(zhì)在溶劑中的溶解度以及萃取效率的。
PSE技術(shù)對于食品中功能成分的提取主要集中在類(lèi)黃酮、酚類(lèi)物質(zhì)以及其他抗氧化活性成分的研究上。該技術(shù)在花青素的提取方面也有報道。采用此技術(shù)優(yōu)化紫甘藍中花青素的最佳提取工藝,最佳參數為:樣品215g,溫度99℃,提取時(shí)間7min,溶劑為V(水):V(乙醇):V(甲醇)=94:5:1。
水溶液提取法
有機溶劑萃取的花青素多有毒性殘留且生產(chǎn)過(guò)程環(huán)境污染大,有鑒于此,水溶液提取應運而生。該方法一般將植物材料在常壓或高壓下用熱水浸泡,然后用非極性大孔樹(shù)脂吸附;或直接使用脫氧熱水提取,再采用超濾或反滲透,濃縮得到粗提物。
微生物發(fā)酵提取法
此方法將生物發(fā)酵技術(shù)應用于花青素的提取之中,是生物科學(xué)與化工生產(chǎn)之間的強滲透與有效結合。微生物發(fā)酵法利用微生物或酶讓含有花青素的細胞胞壁降解分離,使細胞胞體內花青素充分溶入到提取液中,從而增加提取的產(chǎn)率與速率。
其他提取方法
包括高壓脈沖電場(chǎng)輔助提取、雙水相萃取、超高壓輔助提取。前兩種可應用于蛋白質(zhì)、核酸、多糖的提取研究,而超高壓輔助提取已成功用于葡萄中花青素的提取之中,且對比發(fā)現高壓輔助提取花青素等多酚類(lèi)的效率可以提高近50%。